近期恒遠(yuǎn)經(jīng)常接到客戶的：同一條件下，除了測的指標(biāo)不一樣，為什么有張膜顯影，有張未顯影？？？

上海恒遠(yuǎn)技術(shù)分析：在同一條件下，如果一張膜顯影，一張膜未顯影，可以逐一查找原因：

1、你是否兩張膜上都設(shè)有陽性對照？如果有，一張膜有信號，一張沒信號，可能是操作過程中有問題（可能原因是（1）、你結(jié)合底物會不會有問題，即沒有充分結(jié)合好，或者結(jié)合時間太短，（2）、你要確定兩張膜都是用新的底物反應(yīng)液，（3）、就是沒有信號的膜會不會壓片時間太短，如果使用儀器掃片就不存在這種問題，）所以原因比較多，你只能逐一排查。

2、如果沒有設(shè)對照，這個問題就更復(fù)雜，而且解決起來也不科學(xué)。同時，要控制兩個膜條件*一樣是很困難的。即使你是同時做的兩個，那一定有一個先上樣，一個后上樣，而且你跑膠的時候會發(fā)現(xiàn)，兩塊膠上的條帶速度肯定是不一樣的，轉(zhuǎn)膜兩個膜放的位置也肯定不一樣，等等，也許這些小問題都不能導(dǎo)致你壓片不出條帶，我只是想說，兩個條件不可能*相同，western blot實(shí)驗(yàn)就是重復(fù)性比較差，所以一個出一個不出，這樣是正常的。